用途:熱釋光測量儀是研究光合作用的強有力的工具,是研究PSII電子傳輸?shù)挠行结?,廣泛應用于除草劑對PSII的受體效應、QA與QB穩(wěn)定性、光合放氧復合物(OEC)穩(wěn)定性及PSII總體完整性等,還用于光合突變個體的篩選等。
TL6000系列熱釋光測量儀是針對研究PSII能量水平結(jié)構(gòu)而設計的。PSII反應中心光誘導電荷分離導致儲存了吸收光能的激發(fā)電子對的累積。加熱誘導這些激發(fā)電子對的重組,從而引發(fā)光釋放,并在一定溫度范圍內(nèi)形成特異性熱釋光曲線。根據(jù)不同釋光曲線的形狀、峰位和峰值,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對的能量穩(wěn)定性及PSII反應中心功能等。TL200系列熱釋光測量儀有三種不同型號,測量范圍從-90°C到+190°C可選,使用范圍更寬,可以對低溫、高溫段熱釋光進行研究。
原理:熱釋光(Thermoluminescence,縮寫TL)是晶體受到輻射照射后,會產(chǎn)生自由電子,這些電子被晶格缺陷俘獲而積攢起來,在加熱過程中以光形式釋放出來。其基本的實驗過程是將葉片快速冷凍到某一溫度,之后給葉片一個足夠強,但時間盡量短(一般<5μs)的單翻轉(zhuǎn)光(single turn-over ?ash),用于誘導每個PSII反映中心發(fā)生僅一次的電荷分離;然后逐漸升溫,同時測量葉片放出的熱釋光,繪制TL譜帶。
熱釋光研究中的一個主要工具是單次翻轉(zhuǎn)光閃,要求足夠強(光源強度高達 150 000 μmol(photons).m-2.s-1)和足夠短(典型 < 5 微秒)來誘導每一個PSII反應中心發(fā)生一次,且僅一次的電荷分離。光閃的飽和效果可以通過QB段的強度來檢查,它應該在首次光閃后達到最大,在2次光閃后不再增加。當前許多實驗中使用的氙燈光閃具有明顯缺陷——一個長的持續(xù)發(fā)光,或者“閃光拖尾”,這會在某些PSII反應中心中產(chǎn)生兩次的電荷分離(連擊)。雖然激光閃光能夠有效降低連擊,但不能消除。
TL6000系列熱釋光測量儀使用能量足夠強的LED光源,所釋放5-10μs的方波脈沖能夠飽和所有的PSII反應中心,其溫度控制單元可以在降溫后,再使樣品的溫度以0.1℃/sec到 2℃/sec的速率線性增加。不同的閃光序列及樣品處理能夠使樣品處于不同的能量狀態(tài),不同的溫度下釋放的光能源自光合機構(gòu)的不同結(jié)構(gòu)。分析釋光曲線的形狀、峰位和峰值,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對的能量穩(wěn)定性及PSII反應中心功能等。
特點:
·不同型號可選,測量溫度范圍寬,從 -25 至 +200 °C;
·可變高光強光源(627nm)用于S狀態(tài)躍遷分析;
·可變長時間光源(627nm)用于預定溫度下的照明;
·用于檢測熱釋光峰值檢測的靈敏光電倍增二極管;
·程序控制電子閥門保護光電倍增二極管;
·環(huán)境光保護,確保測量都在標準實驗室條件下進行;
·測量室內(nèi)強制輸送空氣(僅TL 6000/ST);
·含電磁閥的液氮罐(僅TL 6000/ET);
應用領域:
·光合機理研究——捕光色素復合體,PSII反應中心,放氧復合物研究;PSII能級分析;原初反應階段的內(nèi)在過程探測;
·植物脅迫生理的早期檢測與診斷;
·植物病蟲害相關(guān)研究;
·除草劑影響;
·對植物光合研究的完善補充;
系統(tǒng)組成:
主要有3部分組成:多功能控制單元、溫度調(diào)節(jié)控制單元和測量室。
多功能控制單元:根據(jù)用戶定義方案或已置實驗程序運行實驗,兩個輸入通道分別用于測量熱發(fā)光信號(TL信號)和測量溫度。測量曲線有兩種顯示格式:時間/溫度和時間/TL,或者溫度/TL信號。
溫度調(diào)節(jié)控制單元:可以在-25°C 到 +200°C范圍內(nèi)以0.1°C的精確度控制樣品的溫度。系統(tǒng)前面板可以顯示實際的溫度,可以通過手動或軟件調(diào)節(jié)溫度。有恒溫和溫度梯度兩種模式(0.1°C/sec到 2°C/sec線性變化);
測量室包含四個部分:光源、光電倍增管、A/D轉(zhuǎn)換器、具有溫度控制器的樣品盤。
1.光源由8個超亮發(fā)光二極管(λmax=630 nm)組成,發(fā)射的光閃強度高達150,000 μmol(photons). m-2.s-1以上,光閃持續(xù)時間最長為150 μs(典型5-10us),光強和光閃持續(xù)時間通過軟件控制;
2. 光電倍增器可以探測從300到900nm范圍的光量子,從而測量熱發(fā)光信號和緩發(fā)熒光。光電倍增器包括自己的電源;
3.A/D轉(zhuǎn)換器用于光電倍增器的電流放大、軟件控制增益和數(shù)字化,放大器的時間反應固定在50ms,以確定最小取樣周期到100ms;
技術(shù)參數(shù):
溫度控制范圍 | 標準溫度版TL 6000/ST:-25~+70℃; 擴展溫度版TL 6000/ET:-100~200℃; |
控制模式 | 恒定;線性改變,1.5℃/秒~1.8℃/秒 |
過熱保護 | 是 |
最小采樣周期 | 100毫秒 |
控制方式 | 手動(恒溫),程序定義的溫度曲線 |
樣品盤 | 鍍金銅; 標準版和低溫版:直徑14mm 高溫版:直徑22mm |
典型樣品 | 藻類、藍藻細菌懸浮液和葉圓片 |
光源 | 飽和脈沖光623nm,強度高達300000 μmol(photons)/m2/s; 光化光627nm,強度高達2000 μmol(photons)/m2/s; |
檢測器 | 可以通過軟件靈敏控制的光電倍增器 |
光譜響應 | 300~900 nm |
接通延遲 | 100毫秒 |
環(huán)境光保護 | 提供 |
定制程序 | 可設定時間,專用語言和腳本 |
通訊端口 | 串口或USB |
軟件 | FluorWin3.7 |
供電 | 90~240V |